Sécurité et tolérance des cellules souches mésenchymateuses issues de la gelée de Wharton chez des patients atteints de dystrophie musculaire de Duchenne: étude clinique de phase 1

Points essentiels et résultats:

Parmi les études publiées, ce petit essai coréen est le plus proche du type de cellules utilisé dans notre clinique. Des cellules souches mésenchymateuses de donneur issues du cordon ombilical (gelée de Wharton) ont été administrées par voie intraveineuse à des garçons atteints de dystrophie musculaire de Duchenne (DMD). L’étude était un essai de phase 1 réglementé, approuvé par le ministère coréen de la Sécurité des aliments et des médicaments et mené au Samsung Medical Center de Séoul.

Six garçons ont été inclus, chacun a reçu une seule perfusion, et ils ont été suivis pendant 12 semaines. Il n’y a eu aucun événement indésirable grave et aucune toxicité limitant la dose. Les tests fonctionnels à 12 semaines n’ont montré aucun changement significatif et, en moyenne, la capacité de marche et les scores moteurs ont baissé. Les auteurs indiquent que les résultats étaient insuffisants pour démontrer une efficacité. Il n’y avait pas de groupe témoin.

Objectif:

Déterminer la sécurité, la tolérance et la dose d’EN001, un produit allogénique de cellules souches mésenchymateuses issues de la gelée de Wharton à passage précoce, chez des enfants atteints de DMD. L’efficacité n’était qu’exploratoire.

Méthodes:

L’essai reposait sur un schéma ouvert d’escalade de dose (« 3+3 »). Trois garçons ont reçu la dose faible, et un comité d’examen de la sécurité a analysé leurs données avant que trois autres reçoivent la dose élevée. La toxicité limitant la dose était définie comme tout événement indésirable de grade 3 ou plus dans les 2 semaines suivant la perfusion.

Sept garçons ont été évalués au dépistage et six ont été inclus entre janvier et octobre 2022. Critères d’inclusion:

• Sexe masculin, âgé de 2 à 18 ans
• Mutation de la DMD confirmée et signes cliniques de DMD (faiblesse proximale, démarche dandinante, signe de Gowers)
• Dose stable de corticostéroïdes systémiques, censée rester la même pendant toute l’étude

Étaient exclus les garçons ayant une fraction d’éjection ventriculaire gauche inférieure à 50% à l’échocardiographie, un besoin d’assistance respiratoire ou de ventilation par trachéotomie, une thérapie génique ou de l’ataluren au cours des 24 semaines précédentes, ou des analyses de sang de dépistage anormales et cliniquement significatives.

Les participants avaient de 10,0 à 15,8 ans et tous marchaient encore, avec des distances de marche de six minutes de départ de 231 à 346 mètres et des scores à la North Star Ambulatory Assessment (NSAA) de 8 à 28 sur 34. Cinq prenaient du déflazacort et un de la prednisolone.

Un lot de cellules provenant d’un seul cordon ombilical donné a été multiplié sur trois passages (environ 20 jours) dans un milieu contenant 10% de sérum de veau fœtal, puis congelé dans l’azote liquide à raison de 5 millions de cellules par poche de 10 mL. Les tests de libération portaient sur la stérilité, les mycoplasmes, les endotoxines, le nombre de cellules, la viabilité et les marqueurs de surface (positifs pour CD44, CD73, CD90, CD105, CD166 et négatifs pour CD11b, CD14, CD19, CD34, CD45, HLA-DR).

La dose faible était de 500 000 cellules par kg. La dose élevée était de 2,5 millions de cellules par kg, la dose qui avait fonctionné chez la souris mdx. En pratique, les garçons de la dose élevée ont reçu de 140 à 201 mL de suspension cellulaire.

Les poches ont été décongelées au bain-marie à 37°C et perfusées par voie intraveineuse en 10 minutes. La prémédication était laissée à la discrétion de l’investigateur et se composait d’hydrocortisone 1 à 2 mg/kg, de lorazépam 0,1 mg/kg, d’ondansétron et de chlorphéniramine. Les signes vitaux, la saturation en oxygène et l’ECG ont été surveillés en continu.

Les événements indésirables et la créatine kinase (CK) sérique ont été enregistrés à chacune des sept visites. La spirométrie, la force des extenseurs du genou et des fléchisseurs du coude mesurée au dynamomètre, la NSAA et le test de marche de six minutes ont été réalisés au départ et à la semaine 12. Les données intermédiaires jusqu’à 36 semaines figurent dans le supplément. Un suivi jusqu’à 5 ans est prévu.

Résultats:

Sécurité: Il y a eu 18 événements indésirables en 12 semaines, 6 dans le groupe à dose faible et 12 dans le groupe à dose élevée. Chaque garçon en a eu au moins un. Tous étaient de grade 1 et aucun n’était grave.

• Rougeur, douleur et gonflement au site de perfusion sont survenus chez 2 des 3 garçons du groupe à dose élevée et chez aucun du groupe à dose faible. Ils ont disparu en un jour.
• Maux de tête chez 3 garçons (1 à dose faible, 2 à dose élevée). Un garçon a été gêné par l’odeur du produit pendant environ un jour.
• Les autres étaient une dyspepsie, une douleur thoracique et une sensibilité douloureuse (un garçon chacun, dose faible), une douleur osseuse (un garçon, dose élevée), une infection par le SARS-CoV-2 chez 2 garçons et un rhume chez 2.
• Pas de fièvre, de variation de la pression artérielle, d’éruption cutanée, de difficulté respiratoire ni de choc pendant aucune perfusion.
• Trois autres événements de grade 1 sont apparus d’ici la semaine 36 (21 au total). Aucun événement tardif n’a été attribué aux cellules.
• Les échocardiogrammes de quatre garçons, réalisés à 6 à 12 mois, étaient normaux.

Fonction motrice: Le score NSAA moyen a baissé de 3,33 points dans le groupe à dose faible et de 3,00 points dans le groupe à dose élevée au cours des 12 semaines. Les scores individuels sont passés de 18 à 15, de 25 à 17, de 18 à 19, de 8 à 5, de 28 à 22 et de 14 à 14. Un garçon a gagné un point, un est resté stable et quatre ont décliné, l’un d’eux de 8 points.

La distance de marche de six minutes a baissé en moyenne de 13,8 mètres (dose faible) et de 47,4 mètres (dose élevée). Un garçon sur six a marché plus loin qu’au départ.

La force des extenseurs du genou a baissé de 0,70 lb dans le groupe à dose faible et augmenté de 0,88 lb dans le groupe à dose élevée. Quatre garçons sur six ont eu une certaine augmentation. La force des fléchisseurs du coude a légèrement diminué jusqu’à la semaine 36.

Respiration: La capacité vitale forcée en pourcentage de la valeur prédite a augmenté de 6,67% (dose faible) et de 1,00% (dose élevée), sans que ce soit statistiquement significatif dans aucun des cas. Un garçon n’a pas pu faire le test de la semaine 12 à cause d’une douleur osseuse. Les pressions inspiratoires et expiratoires n’ont pas changé.

CK: Les taux ont eu tendance à baisser jusqu’à la semaine 12, sans signification statistique, et sont revenus au niveau de départ ensuite chez tous les garçons. La CK a fortement augmenté chez certains garçons pendant qu’ils avaient la COVID-19. Les auteurs indiquent qu’ils n’ont pas pu déterminer si la baisse était un effet du traitement ou une fluctuation normale.

Conclusions:

Les auteurs concluent qu’une dose intraveineuse unique de ces cellules était sûre et bien tolérée chez six garçons atteints de DMD, et que l’efficacité ne pourrait être établie que par des essais plus vastes, randomisés, avec des doses répétées. Ils ont enregistré un essai de phase 1/2 multicentrique, randomisé, en double aveugle, contrôlé par placebo (NCT06328725).

Les limites qu’ils indiquent sont une dose unique, un échantillon très petit, 12 semaines de suivi alors que la plupart des essais dans la DMD durent 1 à 2 ans, et des infections par la COVID-19 qui ont perturbé les mesures. En outre, il n’y avait pas de groupe témoin et un déclin est de toute façon attendu chez des garçons de 10 à 15 ans, de sorte que les résultats fonctionnels ne peuvent pas montrer si les cellules ont fait une différence, dans un sens ou dans l’autre.

Informations complémentaires:

Les auteurs ne prétendent pas que les cellules se transforment en muscle. Sur la base de leurs travaux chez la souris, ils proposent que les cellules libèrent des facteurs protecteurs: XCL1 (lymphotactine), qui, selon eux, protège les cellules musculaires de la mort cellulaire programmée, et MMP-1, qui, selon eux, réduit la fibrose musculaire. Ils soutiennent que les cellules au passage 3 sont plus puissantes et moins sujettes au vieillissement en culture que les cellules de passages ultérieurs utilisées dans de nombreux produits, ce qui explique que leur dose soit plus faible que dans d’autres essais de CSM.

Les auteurs notent que la fièvre transitoire est l’effet secondaire le plus fréquent des perfusions de cellules et l’attribuent en partie au liquide vecteur. Ils ont utilisé leur propre formulation sans composants d’origine animale et n’ont enregistré aucune fièvre chez les six garçons. Avec si peu de participants, aucune conclusion ne peut être tirée de cette observation.

Les cellules ont été fournies par ENCell Co., Ltd., le développeur du produit. L’article indique que le promoteur n’a eu aucun rôle dans l’interprétation des données ni dans la rédaction du rapport, et les auteurs ont déclaré n’avoir aucun conflit d’intérêts. Le financement provenait de subventions publiques coréennes pour la recherche en santé et du Samsung Medical Center.